緒論:寫作既是個人情感的抒發(fā),也是對學術真理的探索,歡迎閱讀由發(fā)表云整理的11篇醫(yī)學檢驗論文范文,希望它們能為您的寫作提供參考和啟發(fā)。
受檢標本在送到檢驗部門前都已經(jīng)附帶了病患的基本資料和受檢標本要做的檢測項目、標本采集的方式、標本采集時間、使用的抗凝劑或者其它防腐用藥等一系列的基本信息。檢驗部門在拿到檢驗標本的同時也拿到了患者的基本信息,此時檢驗人員應當對檢驗標本附帶的基本信息進行逐項的審核、確認,確保受檢標本附帶的基本信息準確無誤,如果發(fā)現(xiàn)受檢標本附帶的基本信息有不完整或者不正確的地方,應當立即要求患者補充完整或者拒收,并將患者的所有信息都存進醫(yī)院計算機網(wǎng)絡系統(tǒng)中。
1.2防止人為因素使受檢標本附帶的基本信息的準確性遭到破壞
從標本的采集工作開始一直到標本順利核收結(jié)束,醫(yī)護人員和病患都必須小心謹慎的進行操作,只有這樣才能盡量避免人為因素造成的檢驗結(jié)果不準確的情況。醫(yī)療工作人員應當對標本采集前的準備工作做好嚴格的質(zhì)量監(jiān)控,認真對待每一個環(huán)節(jié),如果有一個環(huán)節(jié)沒有處理好,都會使標本的基本信息在未到達檢驗室時就已經(jīng)發(fā)生了改變,從而導致檢驗結(jié)果不夠準確。因此必須加強相關管理工作,努力減少人為因素的干擾。對此應該嚴格做好以下幾點:
(1)對于空腹抽血檢驗項目,必須嚴格要求患者在空腹的狀態(tài)下抽血,不然會嚴重影響檢驗結(jié)果的準確性。在做血糖檢測、血脂檢測前,要對患者的飲食有所要求、有所限制。
(2)采集標本時患者的也會對化驗結(jié)果有所影響。所以在采集標本時,醫(yī)生應當在患者處于規(guī)定的情況下進行樣本的采集。
(3)輸液也會對檢測結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。輸液前后采集的標本也會有所差異,會使標本在分析前發(fā)生變異,因此一定要盡量避開這段時間,在其他時間段進行采集。
(4)運動也會造成樣本的變化,影響檢測結(jié)果的準確性,所以應當在患者靜止時采集樣本。
(5)標本的轉(zhuǎn)送是否快速及時,也會影響到檢測結(jié)果。
一般受檢的標本都有嚴格的時間要求,如果不及時檢驗,就會使標本的狀態(tài)發(fā)生改變或者腐敗,影響檢驗結(jié)果的準確性。因此采集到樣本以后必須及時送到檢驗部門進行檢驗,保證樣本在新鮮的狀態(tài)下進行檢驗。
2嚴格檢驗設施的質(zhì)量控制
2.1加強檢驗設備控制
目前,檢驗部門的檢驗設備種類繁多,功能各異。如何有效的管理這些設備、提高檢測質(zhì)量是檢驗科應當思考的問題。
(1)加強數(shù)字化管理
用計算機系統(tǒng)來管理檢驗設備,逐步實現(xiàn)檢驗設備的數(shù)字化管理。
(2)定期維護檢驗設備
要保正檢驗設備始終處于良好的工作狀態(tài)中,對檢驗設備進行定期的維護和性能檢測工作,掌握機器每天的工作狀態(tài),并將所做過的維護工作和性能檢測結(jié)果登記在案。嚴格遵守國家有關規(guī)定,有關儀器定期接受國家有關部門的檢測,并保存檢測合格證書。
2.2加強實驗試劑的控制
(1)實驗試劑用計算機進行管理
實驗試劑是檢驗科在檢驗過程中必不可少的,每年的消耗量很大。人為管理難免會造成一些浪費。而使用計算機精確管理下,既可以保證質(zhì)量,又可以避免試劑過期,減少浪費。用計算機管理試劑,既可以準確記錄各種試劑的庫存量,又可以顯示試劑的過期時間,同時還可以查詢試劑的領取人員名單,這樣就大大提高了試劑的使用效率,有效彌補了人工管理的缺陷和漏洞。
(2)根據(jù)儀器的性能選擇適當?shù)脑噭?/p>
比如一些進口儀器對試劑的要求比較高,必須使用相應品牌的試劑才能發(fā)揮出最大的作用,如果使用其他品牌的試劑,會導致檢驗結(jié)果不夠準確。
3加強檢驗過程的管理
應當做好檢驗室的質(zhì)量控制工作,從而保證檢驗結(jié)果的準確性。對檢測過程進行全方位的監(jiān)測,做到及時發(fā)現(xiàn)問題,及時解決問題,不斷改進檢驗技術,提高檢驗結(jié)果的質(zhì)量。
4檢驗報告
每天檢驗科都會做許多檢驗,檢驗報告不但數(shù)量多,而且種類復雜,如果管理不當很容易丟失。所以可以用計算機網(wǎng)絡系統(tǒng)對檢驗報告進行管理,將檢驗報告直接發(fā)送給主治醫(yī)生,這樣既避免了檢驗報告的丟失,又提高了工作效率。利用查詢系統(tǒng),可以將同一患者近期同一項的檢測報告放到一起進行對比,這樣既有利于醫(yī)生分析病患的病情變化情況,又可以讓檢驗人員在發(fā)出檢驗報告前,進行比對,確認報告單準確無誤后再發(fā)。一般來說,患者服用某些藥物可能會對檢測結(jié)果造成一定的影響,而通過計算機網(wǎng)絡系統(tǒng),檢驗人員就可以查看患者的病歷以及患者日常服用的藥物,標記出可能會影響檢測結(jié)果的藥物,從而提高檢測結(jié)果的準確度,為醫(yī)生的治療提供更加可靠準確的信息。
186例非賁門胃癌患者,來自中山大學附屬醫(yī)院住院及門診患者,經(jīng)臨床、胃鏡及病理診斷證實。男81例,女105例,平均發(fā)病年齡(55.19±14.05)歲。隨機選取298例來自武漢大學中南醫(yī)院的健康體檢者,其中男198例,女100例,平均年齡(39.20±14.12)歲。以上個體均為無血緣關系的廣東漢族人,既往無糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、風濕性關節(jié)炎、炎癥性腸病等自身免疫性疾病史。
1.2研究方法
1.2.1Hp的檢測
采用ELISA檢測Hp感染。
1.2.2基因組DNA提取
抽取靜脈血4ml,常規(guī)酚/氯仿抽提基因組DNA。
1.2.3PCR擴增與限制性片段長度多態(tài)性分析(PCRRFLP)
1.2.3.1TLR4Asp299Gly,Thr399Ile基因多態(tài)性檢測
將PCR產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶酶切后以8%的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離、GV1染色。
1.2.3.2CD14C159T基因多態(tài)性檢測
引物設計及反應條件參照文獻,引物為F:5′TGCCAGGAGACACAGAACCC3′,R:5′TGTCATTCAGTTCCCTCCTC3′,PCR產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶酶切后以8%的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離、GV1染色。
1.2.4統(tǒng)計學分析
病例組和對照組人群HardyWeinberg平衡采用χ2擬和優(yōu)度檢驗,等位基因及基因型頻率采用直接計數(shù)法計算,χ2檢驗差異的顯著性水平(檢驗水準為α=0.05),相對風險度用OR(Oddsratio)值及95%可信區(qū)間(95%CI)來評價。
而且輔導員隊伍的年齡層次都較年輕,與學生交流沒有代溝,能很好地融入到學生群體,能從學生的角度進行教育和指導,學生也更容易接受,不容易產(chǎn)生逆反心理和抵觸情緒。然而,目前高校不斷擴招,學生數(shù)量逐年增加,輔導員人數(shù)遠達不到國家教育部規(guī)定的師生比1:200配備的要求。輔導員的工作內(nèi)容瑣碎、繁重,除了完成所在二級院系交給的工作任務外,還要完成學校、校黨委、學工處、教務處、財務處等各部門分派的與學生相關的一切事務。對于應對日常事務已經(jīng)相當繁重的專職輔導員,還要評職稱、寫論文,進行學生思政教育等方面的研究。因此,細心關注每一個學生的思想、行為動態(tài)的精力和時間少之又少。最重要的一點就是,大部分的專職輔導員所學的專業(yè)為思想政治教育或教育管理專業(yè),與醫(yī)學專業(yè)完全不同,這些輔導員在學生學業(yè)指導以及未來發(fā)展和職業(yè)生涯規(guī)劃方面,常常心有余而力不足,無法提供學科專業(yè)上的幫助和意見,此外輔導員對學生的思想政治教育也難以和學生的專業(yè)相結(jié)合。
2.兼職班主任崗位的設立,在一定程度上減輕了專職輔導員的部分工作壓力,兼職班主任通常管理1個班級。
配合輔導員做好所管班級的學生工作,包括學生的思想政治教育、關心學生的學習生活、在學習和生活中給予學生一定的幫助,尤其是家庭困難學生和后進生。兼職班主任可以是學生的課任老師,也可以是在學校里從事其他行政工作的人員。由于兼職班主任有自己的專職工作,班主任只能利用工作之余的時間來處理學生的事務,因此對學生工作的完成效率和用心程度參差不齊。用心的老師能把學生當成自己的孩子,對學生的關心無微不至。也有老師只把當班主任作為職稱評定中必須完成的任務,應付了事。
3.當今社會經(jīng)濟多元化,網(wǎng)絡無處不在,在這種不同于以往的、高速發(fā)展的時代下成長起來的當代大學生,有著這個時代的特點。
他們思維活躍,眼界開闊,創(chuàng)新意識強,敢于挑戰(zhàn)新鮮事物;但當代大學生大多數(shù)是獨生子女,成長環(huán)境優(yōu)越,從小到大在長輩的呵護下成長,沒有受到大的挫折,缺乏獨立性,抗壓受挫能力差。一些學生離開父母在大學里過集體生活,面對一些學習、生活或人際交往上的小問題,往往不知道該如何處理,少部分學生甚產(chǎn)生了嚴重的心理問題,如抑郁癥等。其次,部分學生責任心不強,做事不細心。而對于醫(yī)學檢驗專業(yè)的學生,將來從事醫(yī)務工作,需要的正是用責任心和細心完成每一次的檢驗工作,確保檢驗報告準確無誤。第三,喜歡以個人為中心,功力心強,做事情只考慮個人得失,不顧他人的利益,缺乏奉獻精神,凡事付出要求有相應的回報。拜金主義、享樂主義的不良社會風氣也容易使大學生缺乏正確的人生觀、價值觀。同學之間相互攀比,揮霍父母辛苦掙來供他們讀書的錢。第四,在互聯(lián)網(wǎng)高速發(fā)展電子產(chǎn)品日新月異的時代,網(wǎng)絡豐富了我們的生活,給生活帶來了方便。對于在校大學生,網(wǎng)絡也給他們的學習提供了極大的幫助。但現(xiàn)在的學生對網(wǎng)絡過于依賴性強,遇到問題不愛思考,習慣在網(wǎng)上“百度”。部分學生自制力差,沉迷于網(wǎng)絡游戲不能自拔。由以上幾點可以看出,新時期的學生管理工作,單一的由輔導員或班主任管理的工作模式都存在缺陷,還有待完善。因此嘗試建立一種以導師、輔導員、班主任三者協(xié)作的學生管理模式,從各種不同的角色入手,三者既獨立分工又相互合作,把教學和育人相結(jié)合。
二、9A導師制的建立及具體實施
與以往的科研導師制不同的一種新的導師制———9A導師制。它是通過圍繞導師對學生的臨床操作能力、語言溝通表達能力、文獻信息檢索能力、自主學習能力、團隊協(xié)作能力、計算機和外語運用能力、科研創(chuàng)新能力、科技論文寫作能力、就業(yè)力等9個方面的針對性培養(yǎng),最終使學生達到“3個自信”,即理論自信(扎實的基礎理論知識)、技能自信(較高的綜合素質(zhì))、就業(yè)自信(就業(yè)力強)。選聘的9A導師來自醫(yī)學檢驗學院從事專業(yè)教學的老師或附屬醫(yī)院檢驗科從事臨床檢驗的老師及在檢驗學院從事學生工作的輔導員。部分導師是該行業(yè)的專家,這對于學生專業(yè)能力的培養(yǎng)有著得天獨厚的優(yōu)勢。學生不僅能從導師那里學到檢驗的臨床操作技能,而且能在導師的指導下進行科學研究,培養(yǎng)學生的科研創(chuàng)新能力和論文寫作能力。9A導師制實行四年一貫、利用課余時間、師帶徒式導師制。根據(jù)學生潛力和個性,有針對性選擇“9A”中的2項及以上給予強化培養(yǎng)。導師與學生的比例在1:2—8左右,學生在校期間的培養(yǎng)完成后,對學生進行成績評定,評出優(yōu)秀、良好、合格三個等級。同時,對所帶學生獲得優(yōu)秀的導師給予獎勵,這樣也能一定程度提高教師的積極性,保證9A導師制的順利開展。9A導師制與傳統(tǒng)導師制的優(yōu)勢在于,導師在培養(yǎng)學生專業(yè)知識、科研能力的過程中與學生有更多面對面的交流和接觸,更容易了解所帶學生的學習、性格、愛好等特點,結(jié)合每個學生的實際情況對學生進行思想政治教育,讓學生樹立正確的人生觀、價值觀,以一種積極向上的態(tài)度進行學習。
三、9A導師、輔導員、班主任三者協(xié)作管理模式的優(yōu)勢
1.充分利用教師資源,在短期內(nèi)解決了學生管理人員短缺的問題。
近5年,高校擴招,學生人數(shù)大大增加,我校檢驗學院的學生人數(shù)從原來的一個年級2個班擴大到最多一個年級7個班。雖然學校在不斷地增加專職輔導員編制崗位,但要達到國家教育部規(guī)定的1:200的要求,總有一定的滯后性。9A導師、輔導員、班主任三者協(xié)作的管理模式,使加入學生管理工作的人數(shù)增加了兩倍。在保障學生管理工作順利開展的同時,還減輕了輔導員工作量大的壓力。這樣,輔導員就不僅僅只停留在完成各種日常管理工作上,能有充足的時間,更系統(tǒng)、更科學的來開展學生的思想教育工作和提升輔導員的科研能力水平。所以,三者協(xié)作的管理既提高了工作效率,也提高了工作質(zhì)量。
2.分工明確,提高學生指導的針對性。
學生管理工作模式的不斷完善,9A導師、輔導員、班主任三者通力協(xié)作,在我校檢驗學院的學生管理中起到了重要的作用。改革后的學生管理工作的分工更為科學和明確,輔導員負責整個年級的學生管理,主要從宏觀了解全年級學生的思想動態(tài)、學習風氣,從整體上對學生進行科學、系統(tǒng)、全面的管理。班主任對學生的管理主要從班級學風建設、及學生個體入手,一方面協(xié)助輔導員從面上管理班級,另一方面又能細致入微為個別學生提供學習和生活上的幫助。9A導師則以導師組為單位,開展內(nèi)容豐富、形式多樣的活動,例如:開展知識小講座,參與導師的科研研究,提前接觸臨床檢驗操作等。9A導師制在學生學習能力、科研能力的培養(yǎng)、就業(yè)指導和推薦方面起到了很大的作用。
本組一共有7例胰腺-實性假狀瘤患者,男1例,女6例,年齡均在20~59歲之間,平均年齡為32歲。7例中有2例出現(xiàn)腹部疼痛而就診;有1例患者因為感覺腹部內(nèi)含有塊狀物就診;有2例是CT影像學檢查發(fā)現(xiàn)左腎上腺占位;2例患者進行B超檢查發(fā)現(xiàn)胰腺占位而就診。本組的7例患者腹部均未有過手術史、外傷史以及胰腺炎病史。檢查患者的身體:其中有3例患者在觸診可捫及腹部腫塊,卻均無明顯的陽性體征。7例患者的糖苷類抗原19-9(CA19-9)、糖類抗原125(CA125)、血清癌胚抗原(CEA)等腫瘤的標記物檢查均未發(fā)現(xiàn)任何的異常。7例患者通過B超、CT以及MRI等檢查發(fā)現(xiàn)腹部包塊,卵圓形或圓形,呈實性、囊性或囊實性的腫物,界限清晰。7例患者在術前的診斷:胰腺囊腺瘤有2例,胰腺囊腺癌有1例,左腎上腺占位有2例,腹膜后占位有1例,有1例確診為小腸間質(zhì)瘤。
1.2方法
本組的7例患者均采用手術治療。手術過程中發(fā)現(xiàn)有1例患者因為腫物的浸潤致使脾臟的動脈靜脈被包繞;有3例患者因為腫物與脾臟發(fā)生了粘連現(xiàn)象,因此必須實行胰體尾切除術和脾臟的切除術;其他的患者均進行單純的腫物切除術。其中有2例患者在手術中經(jīng)過使用細針穿刺細胞病理學的檢查證實為該病。手術完成之后切下的腫物均采用病理學檢查,并進行免疫組化分析。使用10%的福爾馬林固定標本,在脫水之后用石蠟包圍,做切片為4μm,采用蘇木素-伊紅進行染色。免疫組化分析使用鏈霉素抗生素蛋白-過氧化物酶染的方法進行。所使用的抗體有孕激素受體、波形蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶、角蛋白等。
2結(jié)果
2.1病理檢查
2.1.1巨檢
7例患者中有2例患者的腫物位于胰腺的頭部,有2例位于胰體,3例位于胰尾。腫物直徑為4~15cm,平均為8cm。其中有4例患者的包膜比較完整,3例患者的包膜不完整而且還和脾臟發(fā)生粘連現(xiàn)象。腫物的切面囊實性,囊性區(qū)為灰褐色,實性區(qū)為灰白色,在囊性區(qū)還能見渣物樣,還有2例患者的囊壁出現(xiàn)了鈣化。
2.1.2組織學檢查
腫瘤由不同比例的實性、假和囊性結(jié)構(gòu)混合組成。腫瘤的實性區(qū)由形態(tài)一致,中等大小的細胞組成,瘤細胞呈巢狀、片狀和一些不規(guī)則的梁狀排列。細胞質(zhì)較為豐富,呈透明狀或嗜酸性,有時還會含有過碘酸雪夫染色陽性的嗜酸性小滴。細胞核呈卵圓形或圓形,其中的染色質(zhì)細膩、均勻,還能見到凹陷或者是核溝,核分裂很少見。在腫瘤間質(zhì)內(nèi)有較為豐富的血管,在距離血管較遠處的細胞常出現(xiàn)壞死、變性,致使殘留在血管旁的細胞環(huán)繞著血管形成了假狀的排列,纖細的血管軸心常常呈明顯的透明變性和黏液變性。假狀結(jié)構(gòu)之間的空隙內(nèi)充滿大量的紅細胞,呈血管瘤樣改變。實性區(qū)或出血灶周圍可見膽固醇裂隙和泡沫細胞積聚。
2.1.3免疫組化分析
免疫組化是診斷腫瘤的關鍵,診斷此瘤須輔以免疫組化。本文7例SPTP報道中,PR陽性的有5例(5/7);NSE的陽性有7例(7/7)Vientiane的陽性有4例(4/7);CK的陽性有4例(4/7);Sin的陽性有2例(2/7)。
2.2治療及隨訪
本組的7例患者在手術之后有1例出現(xiàn)了胰瘺,進行了保守治療之后痊愈出院,其他的6例患者手術療效甚佳,痊愈之后出院。
3討論
3.1臨床特點
胰腺實性假狀瘤是發(fā)生在胰腺或胰腺周圍的比較少見的腫瘤,發(fā)生在胰腺周圍罕見,可能起源于異位胰腺。該瘤細胞既能表達上皮性標記物和間葉性標記物,且能表達內(nèi)分泌和外分泌標記物,因此多數(shù)學者認為來源于胰腺的潛能干細胞。該病的發(fā)病率較低,臨床上并無特異性的表現(xiàn),長以體檢發(fā)現(xiàn)或腹部腫塊為首發(fā)癥狀,但同時由于部分醫(yī)生在檢查上的認識不到位,常會將該病誤診,進而以過術后的病理檢查能確診該病。本文報道的7例胰腺SPT發(fā)生與胰腺的任何部位,并未出現(xiàn)很明顯性的傾向,2例位于胰體,2例位于胰腺頭部,3例位于胰尾;有3例出現(xiàn)包膜不完整且與脾臟粘連,2例囊壁鈣化。WHO把SPT定性為具有低度惡性潛能的腫瘤,因此術前正確診斷是至關重要的,對手術范圍起決定性作用。Pettiness等認為,SPT術前及術中細針穿刺細胞病理學是診斷這種少見胰腺腫瘤的可靠依據(jù)。由于診斷有不確定性和腫瘤細胞可能因穿刺而播散,也有學者認為不宜穿刺活檢。鑒于SPT絕大多數(shù)為良性,我們認為穿刺細胞病理學可行,以提高術前正確診斷率。
3.2鑒別診斷
①胰腺內(nèi)分泌腫瘤:臨床上此瘤常伴有神經(jīng)內(nèi)分泌紊亂癥狀,組織學上腫瘤一般無完整包膜,多數(shù)伴不完整且和脾臟發(fā)生粘連現(xiàn)象,易伴出血、壞死及囊性變。②黏液性囊性腫瘤:此瘤常見于胰尾,體積較大,呈囊性,單房或多房囊腔內(nèi)含膠狀混濁液體,伴明顯纖維性包膜。③胰母細胞瘤:此瘤多發(fā)生于男性兒童,腫瘤由上皮成分和間葉成分構(gòu)成,在腫瘤中總可找到似胰腺的腺泡、腺樣結(jié)構(gòu),若以腺泡排列的上皮細胞巢為主,常可見鱗狀小體,無假狀瘤結(jié)構(gòu);免疫組化結(jié)果顯示胰酶陽性而Vientiane陰性。
3.4治療與預后
二、基于抗原抗體結(jié)合的檢測
細菌的內(nèi)部和表面含有大量的抗原決定簇,因此可以利用抗體抗原的結(jié)合原理利用抗體標記細菌,然后用標記酶(如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等)與抗體結(jié)合,酶催化的呈色反應可以間接反映細菌的種類和數(shù)量。目前,很多重要的病原物均有相應的抗體,如抗HCV、抗HAV、梅毒抗體、抗HIV、優(yōu)生優(yōu)育TORCH系列等。該法具體程序為采用預先包被了的細菌單克隆抗體的微量塑料板,加入增菌液處理的樣品,反應后再加入一定的指示劑,作用完畢后用酶標儀測定OD值來判定結(jié)果。因此,要得出可靠的結(jié)果,供試樣品首先必須進行預增菌、選擇性增菌,以便提高檢出陽性率。此法除保留抗體、抗原反應的高度特異性外,由于標記酶的酶促反應的放大作用,使測定的靈敏度更高,檢出細菌極限范圍在105-106cfu/ml。
三、基于遺傳物質(zhì)的鑒定
1、聚合酶鏈式反應法
聚合酶鏈式反應英文簡稱PCR,是近年應用較為廣泛的分子生物學檢測技術,尤其適用于培養(yǎng)困難或傳統(tǒng)的血清學方法不易檢測的病原細菌。該法的原理是:地球上每種生物的遺傳物質(zhì)是不同的,聚合酶鏈式反應就是擴增生物中的特異性基因片段進而對生物進行鑒定的,例如沙門氏菌就有多個特異性基因,陳洪認為,編碼細胞膜外膜含鐵細胞受體的基因?qū)ι抽T氏菌診斷有特異性;還有學者認為gyrA基因和rcsC基因之間的插入序列為傷寒沙門菌所特有,對傷寒有診斷意義,可以利用這些特異性的片段制作檢測探針,目前,根據(jù)上述基因設計引物用于人體或自然界中細菌的檢測,并形成了試劑盒作為商品銷售。聚合酶鏈式反應需要的條件有引物、模板和四種脫氧核苷酸,反應過程包括高溫變性、低溫退火和延伸三個階段,經(jīng)25-30個循環(huán),一個DNA分子就可擴增106以上。該技術由于其具備快速、高度的特異性和敏感性,可不用進行細菌的培養(yǎng)等特點。
2、擴增片段長度多態(tài)性方法
擴增片段長度多態(tài)性簡稱AFLP,是目前廣泛應用的DNA指紋技術之一,AFLP通過PCR擴增基因組限制性酶切片段并進行電泳分析。具體步驟是先用限制性內(nèi)切酶切割基因組DNA,接頭序列和相鄰的限制性位點序列作為引物結(jié)合位點,然后將雙鏈接頭連接到DN段的末端,進行電泳呈現(xiàn)不同的譜帶。由于AFLP可以使某一個體出現(xiàn)特定的DNA譜帶,而在另一個體中可能無此譜帶產(chǎn)生,因此,得到的DN段多態(tài)性可作為一種分子標記指紋,為研究細菌屬乃至株間的親緣關系提供了有效手段。AFLP結(jié)合了RFLP和PCR技術特點,具有RFLP技術的可靠性和PCR技術的高效性,但該法不但成本較高,而且需要操作者具備較高的檢驗技術,目前一般醫(yī)院尚難應用。
四、16sRNA鑒定法
2便攜式醫(yī)學檢驗箱的功能特點
使用時,打開支撐腳,根據(jù)所放位置調(diào)節(jié)支撐腳,使箱體水平;打開上蓋,抽出擴展平臺和伸縮桿,將垃圾袋卡于伸縮桿上,醫(yī)學檢驗過程中所需要的小型儀器如血糖儀及多種干式試劑可放置于抽屜內(nèi),吸量管、剪刀、加樣槍等器具夾于彈性繩卡、彈性袋、載物板、掛鉤上,操作平臺上可放置一臺小型離心機、小型顯微鏡及一只小型多功能試管架即可開始工作。檢驗工作結(jié)束后,將操作平臺清理干凈,從伸縮桿上取下垃圾袋,將伸縮桿和擴展平臺縮回箱體內(nèi),蓋上上蓋,通過箱體上的卡扣將上蓋扣實,收回支撐腳,提起提手攜行。
3便攜式醫(yī)學檢驗箱的應用
各類干式儀器如干式電解質(zhì)分析儀、干式尿液分析儀、干式生化分析儀、干式血液分析儀、掌上血氣分析儀、便攜式干式血糖儀正逐漸用于野戰(zhàn)條件下的應急醫(yī)學救治,各種檢測項目所需干式試劑及耗材如各種膠體金檢測試紙條、ABO血型鑒定試劑可以歸類放置。此檢測箱的3個抽屜中分別放置部分生化、臨檢、免疫試劑,另一個抽屜放置一些耗材,配合各類干式儀器開展工作,檢測項目主要包括臨檢、生化和免疫3個方面。
3.1臨檢項目
臨檢項目主要包括血、尿、便3大項常規(guī)檢驗,另外,還可進行血型鑒定及配血。
(1)血常規(guī)。
可進行白細胞計數(shù)及分類,紅細胞計數(shù)、血紅蛋白檢測、紅細胞比積、血小板計數(shù)、瘧原蟲檢查等常見野戰(zhàn)條件下急診及常見病的血常規(guī)檢查。
(2)尿常規(guī)。
可進行尿液常規(guī)分析以及相關項目檢測,包括一般指標、理化指標、尿沉渣檢查。一般指標包括尿量、顏色、密度、透明度、酸堿度;理化指標包括尿亞硝酸鹽、葡萄糖、酮體、尿膽紅素、尿膽原、隱血、紅細胞、白細胞等,這些指標可進行定性或半定量檢查,尿蛋白檢查也可以使用20%磺基水楊酸進行定性實驗;尿沉渣檢查主要包括自然沉淀鏡檢和離心后不染色尿沉渣鏡檢。
(3)便常規(guī)。
包括一般指標和鏡檢兩部分。一般性狀檢查包括形狀、顏色、是否膿血便等;顯微鏡檢查包括直接涂片檢查、蟲卵及包囊濃縮檢查,隱血檢查用潛血試紙法。
(4)血型鑒定及配血。
用玻片法和試管法進行紅細胞ABO血型鑒定、交叉配血,根據(jù)需要可作Rh血型鑒定,交叉配血方法有鹽水介質(zhì)配血法、酶技術配血法等。
3.2生化項目
結(jié)合野戰(zhàn)條件特點,與干式儀器和試劑配合使用,針對野戰(zhàn)條件下傷病員的傷情需要,利用干式電解質(zhì)分析儀等儀器進行檢測。檢測項目10項,包括血液中鉀、鈉、氯、鈣、肌酐、尿素氮、血糖、二氧化碳結(jié)合力、氧分壓、二氧化碳分壓的測定。
3.3免疫項目
檢測項目9項,主要方法是金標法、乳凝法。包括乙肝5項、丙肝抗體、艾滋病抗體、梅毒抗體等。免疫學檢查項目主要是傳染性疾病。
4便攜式醫(yī)學檢驗箱應用效果分析
多功能、便攜式醫(yī)學檢驗箱的研究,符合野戰(zhàn)條件下的工作需求,在多次訓練和演習任務中,為傷病員的快速診治起了積極的作用。該多功能、便攜式醫(yī)學檢驗箱的應用效果主要體現(xiàn)在3個方面。
(1)臨檢項目。
只利用顯微鏡及一些簡單的設備及試劑就可進行檢測,基本滿足了野戰(zhàn)條件下急診手術及常見病的常規(guī)檢查。
(2)生化項目。
配合干式便攜式生化分析儀等儀器,簡便快速地完成多項重要指標的檢驗,為臨床快速診斷提供可靠依據(jù)。
(3)免疫項目。
對多種傳染病有一定的預測效果。在野外及應急情況下,用攜帶方便、操作簡單的金標試劑診斷傷病員傳染病感染情況。與各類便攜式儀器配合使用,基本滿足了緊急救治的需要,整體上達到救治保障有力的目的,特別適用于野外及應急條件下患者的檢驗,構(gòu)成了一個移動式臨床檢驗平臺。
醫(yī)學檢驗后的廢棄物主要有標本、菌種、自動分析儀器的廢水等,如果不能夠?qū)︶t(yī)學檢驗后廢棄物進行妥當?shù)奶幚聿粌H會對環(huán)境造成傷害,造成污染情況的發(fā)生,也會在一定程度上引起醫(yī)院交叉感染的現(xiàn)象,在一定程度上增加了患者的痛苦。
1.2在檢驗過程中標本周轉(zhuǎn)的時間過長
檢驗過程中標本周轉(zhuǎn)的時間又被稱為結(jié)果回報的時間,就是指從申請檢驗項目時候起到取回相關的檢驗報告時為止。筆者認為,在整個檢驗的過程中最需要關注的就是標本周轉(zhuǎn)所需要的時間,這一指標能夠反應出實驗室工作的效率情況。在實際工作中影響標本周轉(zhuǎn)時間的因素主要由實驗室的信息系統(tǒng)、實驗室分析系統(tǒng)、實驗室人員的基本素質(zhì)、需要檢驗的標本數(shù)量。從標本數(shù)量這一方面的因素上來看,這一情況主要表現(xiàn)在兩個方面:
1)、醫(yī)院檢驗科需要檢驗的標本量過多,而相關檢驗的人員人手出現(xiàn)不足的情況,因此會出現(xiàn)標本周轉(zhuǎn)的時間過長的情況;
2)、部分醫(yī)院中標本量過少,而少量多批地對樣本進行檢驗需要的檢驗成本過高,因此會人為地延長標本周轉(zhuǎn)的時間,進而出現(xiàn)標本周轉(zhuǎn)的時間過長的情況。
1.3在發(fā)放報告單的過程中會暴露患者的隱私
此種情況主要發(fā)生在小醫(yī)院,檢驗科的人員會將檢驗的報告單放在固定處,讓患者自行認領,但是患者在認領的過程中經(jīng)常會發(fā)生隨意翻閱的情況,從側(cè)面泄露了患者的隱私。就算有些醫(yī)院使用工作人員發(fā)放這一方式,但是如果遇到重名、音同字不同的情況就很容易出現(xiàn)發(fā)放錯誤的情況,進而暴露患者的隱私。
2醫(yī)學檢驗過程中需要遵循的倫理原則
上文中論述了在目前醫(yī)學檢驗過程中存在的相關問題,筆者認為在檢驗過程中遵循下述的倫理原則就能夠有效避免上述情況的發(fā)生。
2.1自主性的原則
在標本采集前患者會出現(xiàn)過度擔心的問題,例如具有創(chuàng)傷性的標本采集而帶來的疼痛等,因此在很大程度上會出現(xiàn)情緒上的變化,這種情緒的影響在一定程度上影響了檢驗的結(jié)果,因此相關工作人員在采集標本的過程中需要做到自主,對患者的不良情緒進行梳理。另外還需要告誡患者標本采集需要注意的問題,主動履行告知的義務。
2.2保密性原則
保密性原則是醫(yī)學檢驗過程中需要遵循的,最為重要的倫理原則,雖然屬于較為古老的范疇之內(nèi),但是生命力較強,在現(xiàn)代化的社會中依然適用。在保密性原則在實施的過程中總需要尊道以下兩個方面:
1)、不有意探聽患者的隱私,如果患者檢驗的結(jié)果會給患者帶來沉重的打擊需要保密;
2)、在檢驗報告單發(fā)放的過程中需要核實患者的信息情況,減少錯況發(fā)生的幾率。
2.3效率性原則
2“導師制”的科研創(chuàng)新小組開啟學生科研之路
科研素質(zhì)是對醫(yī)學生特別是以實驗醫(yī)學為主要方向的醫(yī)學檢驗學生必不可少的能力要求,是培養(yǎng)創(chuàng)新人才的核心。本校主要采用“導師制”的科研創(chuàng)新小組的方式,以現(xiàn)有的“檢驗協(xié)會”為基礎,緊密結(jié)合學生自身興趣與教研室的實際情況,加強學生科研能力的系統(tǒng)化培養(yǎng)和訓練。四川大學華西臨床醫(yī)學院檢驗協(xié)會是學生自治組織,依托于實驗醫(yī)學科,以學生為主體,以基礎科研為核心,不僅有醫(yī)學檢驗系的學生參加,還有很多臨床醫(yī)學院非檢驗專業(yè)學生參加,包括臨床八年制學生,目前有會員40人,指導教師20余人。科研能力是一項綜合的能力,它包括查閱和處理文獻資料的能力、實驗設計能力、實驗操作能力、實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理能力及實驗的總結(jié)和論文撰寫能力等。在“導師制”的科研創(chuàng)新小組中,一名導師面向2~3名學生,對學生的科研活動進行引導、規(guī)范。在科研活動中,學生通過課題設計、文獻檢索、實驗操作、結(jié)果分析、論文撰寫等一系列活動,閱讀相關文獻、參加學術活動,除了可以及時掌握學科發(fā)展的方向及脈搏外,還能養(yǎng)成嚴謹?shù)目蒲凶黠L并培養(yǎng)創(chuàng)造性思維。目前該協(xié)會成員已參與完成多項導師主持的科研課題,并參與了論文的撰寫工作。另外協(xié)會成員還申請到多項“四川大學大學生創(chuàng)新計劃項目”,多數(shù)已在實施和結(jié)題階段。
2優(yōu)化實驗教學的多樣化教學模
根據(jù)多年教學、科研和臨床的經(jīng)驗,筆者認為多樣化教學模式的開展對于在課堂教學中培養(yǎng)學生的臨床思維是非常必要的。
2.1多媒體組合教學
醫(yī)檢專業(yè)本科教育開設分子診斷學時間不長,實驗教學中還存在一些期待改進的地方,其中實驗教學軟件這方面就比較欠缺,國內(nèi)目前難以購置較好的整體優(yōu)化的分子診斷學實驗多媒體課件和影像教學片,創(chuàng)作整體優(yōu)化的分子診斷學應用型實驗教學多媒體課件將提高分子診斷學實驗的教學效果,并為暫時尚不具備條件的醫(yī)學院校開設應用型分子診斷學實驗提供較為理想的課件,提高教學效果。多媒體組合教學就是在教學工作中運用數(shù)碼相機、攝像機、錄像機、大屏幕投影儀以及多媒體計算機和網(wǎng)絡等進行整體組合優(yōu)化,根據(jù)實際情況制作相應的多媒體課件、幻燈片和電視教學片等教學軟件,在課堂上講解實驗理論時,可以先利用多媒體視頻或動畫等方式,為學生演示實驗室常用儀器和器材的工作原理和規(guī)范正確的使用方法、實驗室安全知識以及實驗原理和步驟等,這樣學生可獲得直觀印象,加深對實驗技能的理解。教師還能利用多媒體手段在課堂外,將多媒體技術、網(wǎng)絡技術和視頻技術聯(lián)合應用進行多媒體網(wǎng)絡教學,向?qū)W生展示現(xiàn)代分子診斷學研究設備、新的研究技術以及受實驗條件、學時和安全性的限制使得學生無法直接接觸到的實驗操作,使學生能夠及時了解到分子診斷學實驗的最新研究手段,同時同學們還可以掌握規(guī)范正確的操作,又可在網(wǎng)絡上模擬整個實驗過程,提高學生的學習興趣和動手操作能力,進而達到加深學生對分子診斷學實驗的整體認識和掌握常用疾病針對性實驗室檢測的目的,實現(xiàn)學生與計算機的交互、學生與學生的交互、學生與老師之間的交互,大家共同學習,學習的方式和環(huán)境發(fā)生了改變,知識的傳播不再受時空的制約,并可實時進行。通過多媒體組合教學的方式,學生可以在短時間內(nèi)增加信息量,拓展知識面,開闊眼界,從而提高實驗教學的效果。
2.2分組討論
在實驗前可設置與實驗相關的臨床問題,引起學生的思考,帶著問題進行實驗,在實驗的過程中以及結(jié)束后,針對預設性問題、實際遇到的問題和異常的結(jié)果以小組形式展開討論,討論不僅進一步加強學生對實驗原理、操作和結(jié)果的理解,還可加強學生團結(jié)合作的意識。
2.3雙語教學
根據(jù)實驗相關內(nèi)容,結(jié)合分子診斷的最新知識和學生外語水平實施雙語教學,同時教師向?qū)W生講授查閱文獻的途徑、技能和方法,并引導學生閱讀一些有關的論文文獻。雙語教學有利于鞭策教師提高自身綜合素質(zhì),更有利于學生提高運用專業(yè)英語水平的能力,指導學生查閱國際最新的文獻資料,及時了解前沿科學技術發(fā)展情況,豐富課外科研知識。
2.4實驗報告論文
采用論文的形式寫實驗報告,根據(jù)原理、操作步驟,結(jié)合相關理論知識和文獻,對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行充分論述,借以提高學生的問題分析能力,鍛煉學生的語言表達能力和邏輯思維能力,并可為日后論文的撰寫奠定基礎。
2.5完善實驗的系統(tǒng)性和完整性
實驗內(nèi)容主要包括分子生物學最基本的實驗技術及不斷加入的、隨技術發(fā)展的、能與臨床學科通匯貫通的先進性、臨床型實驗,以疾病為主線,以國家批準的臨床常用的診斷試劑盒為材料。另外還可以將教師的科研課題結(jié)合到綜合性實驗中,用新穎、前沿的實驗內(nèi)容激發(fā)學生的求知欲,進一步提高學生學習實驗課的興趣和主動性。經(jīng)過這些綜合性實驗加強學生對各知識點的融會貫通,強化學生對整體知識的掌握。按教學規(guī)律和大綱要求安排實驗教學內(nèi)容,改變傳統(tǒng)的實驗教學內(nèi)容,整體優(yōu)化選擇臨床應用型分子診斷學實驗中最常用的關鍵技術為題材。擬為:(1)質(zhì)粒DNA的提取;(2)真核細胞DNA和mRNA的分離純化;(3)限制性內(nèi)切酶的應用;(4)DN段的連接;(5)核酸的鑒定;(6)重組質(zhì)粒在體外的表達;(7)表達產(chǎn)物的分離和純化;(8)Westernblot;(9)轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)染;(10)實時熒光定量PCR檢測乙肝病毒DNA;(11)實時熒光定量RT-PCR檢測丙肝病毒RNA;(12)流式細胞術分析淋巴細胞亞群;(13)CD4+CD8+絕對計數(shù);(14)流式細胞術檢測HLA-B27;(15)DNA指紋分析;(16)改良TRAP法檢測端粒酶的活性。其中核酸的分離、純化、酶切、連接、鑒定與表達是最基本的分子生物學的技能訓練,實時熒光定量PCR是臨床上用于絕對定量病患體內(nèi)微生物核酸量的最常用的方法,流式細胞術屬于臨床常用的是一種在功能水平上對生物分子進行定量分析的檢測手段,改良TRAP法檢測端粒酶的活性是綜合性實驗,包括提取小鼠組織DNA、勻漿、測蛋白含量、PCR、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。
所有136例患者均符合CRF診斷標準,血清肌酐(Scr)在168-707μmol/L,之間,平均377.15±14μmol/L,其中男78例,女58例,原發(fā)病:慢性腎炎76例,糖尿病腎病26例,高血壓腎病18例,多囊腎6例,狼瘡性腎炎4例,痛風性腎病4例,紫癜性腎炎、多發(fā)性骨髓瘤各1例。大部分患者有不同程度的倦怠乏力、納少腹脹、惡心嘔吐、腰酸膝軟、面色晦暗、夜尿清長等表現(xiàn)。所有入選病例隨機分為治療組和對照組,每組68例,兩組病人在性別、年齡、腎功能損害、臨床表現(xiàn)等方面無明顯差異(P>0.05)。
1.2治療方法
對照組給予:(1)優(yōu)質(zhì)低蛋白、低磷飲食,每天攝入蛋白質(zhì)0.6-0.8g/Kg,磷的攝入量600mg/d。(2)控制高血壓:有高血壓者給予伊那普利(5-10mg,qd),若血壓控制不滿意,再加用硝苯地平控釋片(20mg,q12h),保持舒張壓在80-90mmHg之間,收縮壓在130-140mmHg之間。(3)糾正水電解質(zhì)失衡及酸中毒。治療組在對照組的基礎上加服腎衰寧膠囊4粒,每日3次,藥用炭膠囊3-5粒,每日3次,餐后2小時服,3個月一療程。
1.3觀察指標
觀察治療前及治療后15天、30天、60天、90天時的臨床表現(xiàn)及血常規(guī)、尿常規(guī)、腎功能、肝功能、電解質(zhì)、血脂等。
1.4統(tǒng)計學方法
統(tǒng)計結(jié)果用(X±S)表示,采用SPSS10.0軟件包作t檢驗,以P<0.05具有統(tǒng)計學意義。
2結(jié)果
2.1療效判定標準
顯效:臨床癥狀和體征減輕或消失,Scr降低>30%。有效:臨床癥狀和體征減輕或消失,Scr降低5%—30%。無效:臨床癥狀和體征未減或未減輕,Scr降低<5%。
2.2兩組臨床總療效比較
治療組對CRF療效確切,總有效率73.52%,明顯優(yōu)于對照組(29.44%),兩組療效比較有統(tǒng)計學差異(*P<0.01)。
2.3治療前后檢測指標比較
在臨床醫(yī)學治療中發(fā)現(xiàn)某些特定組織因為藥物會產(chǎn)生一定的親合力作用,會造成相應組織產(chǎn)生危害。例如,抗凝藥肝素的使用會造成機體脂蛋白酶的大量釋放,影響血液中的甘油三酯含量降低;左旋多巴是治療臨床山治療震顫首選藥物,但左旋多巴的使用會造成尿中酮體的異常變化,影響正常的反應效果,掩蓋正常的臨床反應結(jié)果,造成結(jié)果的判斷困難;青霉素和紅霉素的藥理特性是具有一定的弱酸性,經(jīng)腎臟的排泄過程會與尿酸的分泌產(chǎn)生競爭問題,造成血液中尿酸濃度的升高;利尿藥物會對腎臟造成保鈉排鉀的作用,造成血液中鉀離子的含量明顯下降,這直接影響整體鈉元素、鉀元素的臨床檢測結(jié)果。
1.2干擾素的臨床藥物影響
藥物會影響藥理學產(chǎn)生一定的臨床醫(yī)學效應。例如,半胱氨酸會造成血液中酮體的陽性,影響實驗結(jié)果;酚酞會造成尿液成紅色,影響酚磺酞的排泄,加快其排泄的速度;吡嗉酰胺與硝基氰組合作用影響尿的測定,影響檢測結(jié)果;青霉素類的藥物會造成紅細胞的非特異性與白蛋白結(jié)合。另外,藥物的代謝產(chǎn)物也會對臨床檢測結(jié)果產(chǎn)生一定的干擾,苯湖泊會造成尿呈桔紅色,氨苯蝶呤造成尿呈藍綠色,維生素類藥物的服用會造成尿呈黃色。酚酞類藥物服用后,一部分會被人體吸收,由尿排出,尿液呈現(xiàn)紅色;利福平眼藥水或口服液會造成肝臟分解成乙酚基產(chǎn)物,呈現(xiàn)橙紅色,甚至造成痰、汗液等呈現(xiàn)橙紅色。
2加強藥物藥理研究,保證臨床醫(yī)學結(jié)果的合理預防
2.1合理的分析藥物信息的查詢
充分的利用網(wǎng)絡資源和各地的臨床反饋信息完成藥物信息資源的統(tǒng)計,合理的對藥物的質(zhì)量繼續(xù)合理的穩(wěn)定控制,保證企業(yè)的藥物品種和藥理藥性的多重檢驗,藥品的檢驗與快速檢測判斷相互結(jié)合,充分的發(fā)揮檢驗技術的有效發(fā)展作用,從而發(fā)現(xiàn)藥物檢測過程中的可以問題。將藥物檢測工作與臨床性藥物性質(zhì)相互結(jié)合,確定重要的藥物品種和藥物機理性質(zhì),監(jiān)管藥物檢測工作保證藥物臨床的準確性。
2.2開展對于應急臨床問題的檢驗工作
藥品在臨床實驗使用的過程中一旦發(fā)生異常情況,應當及時從技術層面完成相關原理內(nèi)容的分析,確保藥物質(zhì)量的有效機理檢測過程。建立良好的應急檢測組織管理工作,建立良好的應急組織管理領導隊伍,從而有效的處理在實際藥品臨床使用過程中發(fā)生的突發(fā)事件。在平時要加強應急工作的演習,開放應急藥品處理的綠色通道,保證應急藥品的技術監(jiān)督和管理可以得到有效的質(zhì)量控制。